Resumo Portugues
A mucosite oral (MO) é a reação adversa mais comum da terapia radioinduzida
na região de cabeça e pescoço. A Associação Multinacional de Cuidados de Suporte
em Câncer e a Sociedade Internacional de Oncologia Oral (MASCC/ISOO)
recomendam a terapia de fotobiomodulação tanto de forma preventiva, quanto no
tratamento de todos os pacientes submetidos a radioterapia em região de cabeça e
pescoço, associada ou não à quimioterapia. A fotobiomodulação provou reduzir a
inflamação e a dor e, aumentar o reparo tecidual. Apesar de recomendado, os efeitos
celulares e moleculares da fotobiomodulação ainda são pouco descritos. Diante disso,
para melhor compreender a atuação do laser na MO, o presente trabalho foi proposto
para avaliar o efeito da fotobiomodulação com os diferentes parâmetros do laser de
baixa potência na migração, proliferação e expressão gênica. Para tanto, utilizou-se
um modelo in vitro de mucosite oral, tratado com três estímulos: radiação ionizante,
lipopolissacarídeo (LPS) de Escherichia coli e extrato de Porphyromonas gingivalis
(Pg). O trabalho foi dividido em 2 estudos, apresentados na forma de manuscritos. O
primeiro teve como objetivo definir, por meio do ensaio de citotoxicidade (MTT [3-(4,5-
dimethyl-thiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide]), a potência do laser que
melhor atuou na viabilidade celular de fibroblastos, no modelo in vitro de mucosite
oral. A fotobiomodulação foi realizada em quatro sessões de 6 horas de intervalo, com
660 nm de comprimento de onda. Após 24h da última sessão de fotobiomodulação,
os grupos tratados com 30 mW mantiveram a viabilidade celular, quando selecionadas
as densidades de energia de 2, 4 e 5 J/cm2
. Nos grupos tratados com 40 mW, a
viabilidade celular foi reduzida nas densidades de energia de 2, 3 e 5 J/cm2
, com
diferença estatisticamente significante para 5 J/cm2
(p<0.001). Com base nesses
resultados, o segundo trabalho utilizou a potência de 30mW, alterando as densidades
de energia, para avaliar o tempo de fechamento de ferida, morfologia celular e
expressão de α-SMA por imunofluorescência, e expressão gênica por meio de RT qPCR. As análises foram realizadas 24h após a aplicação dos estímulos. Os
fibroblastos tratados com as densidades de energia de 3 e 4 J/cm2
, e os queratinócitos
tratados com 5 J/cm2
, mostraram melhores respostas na migração e proliferação
celular (p<0.05). A maior expressão de α-SMA em fibroblastos foi observada com 3
J/cm2
. Os grupos de 3 e 5 J/cm2 apresentaram um aumento estatisticamente significante na expressão de AKT e MTOR, e o de 5 J/cm2 na expressão de PTEN nos
queratinócitos (p<0.01). Nos fibroblastos, a expressão de PTEN aumentou com 4
J/cm2
(p<0.0001). Na análise das citocinas inflamatórias, os fibroblastos não
apresentaram diferença significativa, enquanto nos queratinócitos, foi observado
aumento na expressão de TNF-α, IL-1β, e NF-κB nos grupos 3 e 5 J/сm2
(p<0.001).
Concluindo, o estudo mostrou que a fotobiomodulação, utilizando 660 nm de
comprimento de onda e 30 mW de potência, foi efetiva para estimular a migração e a
proliferação celular, acelerando o reparo tecidual em modelo in vitro de mucosite oral
radioinduzida. Como observado, diferentes densidades de energia apresentam
diferentes respostas, assim, entender o efeito de cada parâmetro do laser é
fundamental para melhores estratégias de tratamento. A fotobiomodulação é
considerada uma terapia promissora pela capacidade de modular vias envolvidas no
reparo, como a via PI3K-PTEN-AKT-mTOR.
