Atividade anti-inflamatória in vitro do extrato hidroetanólico das folhas de Morus nigra L.
Autor(a)
Carneiro, Amanda de Assis
Orientador(a) Coorientador(a)
Fonseca-Bazzo, Yris Maria
Contato email
carneiro.abiomed@gmail.com
Data de aceite
2023-08-15
Data de disponibilizacao
2023-08-15
Data de publicacao
2023-08-15
Data de defesa submissao
2022-12-12
Citacao
CARNEIRO, Amanda de Assis. Atividade anti-inflamatória in vitro do extrato hidroetanólico das folhas de Morus nigra L. 2022. 83 f., il. Tese (Doutorado em Ciências da Saúde) — Universidade de Brasília, Brasília, 2022.
Tese (Doutorado) — Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências Da Saúde, 2022.
Resumo Portugues
A inibição da inflamação sistêmica tem se mostrado uma estratégia benéfica no
tratamento de diversas doenças crônicas, que representam uma das maiores causas
de mortalidade no mundo. Dessa forma, os receptores ativados por proliferadores de
peroxissoma (PPAR) são alvos farmacológicos interessantes, uma vez que podem
agir tanto pela via metabólica quanto pela via anti-inflamatória. As folhas da espécie
Morus nigra L. possuem flavonoides em sua composição com reconhecida atividade
antioxidante e, frequentemente, associados com a atividade anti-inflamatória. Assim,
este estudo propõe avaliar a capacidade do extrato hidroetanólico das folhas de M.
nigra em ativar os receptores PPAR e promover efeitos anti-inflamatórios em células
de macrófago estimuladas com lipopolissacarídeo de Escherichia coli. O extrato foi
preparado por maceração passiva a frio na proporção de 1:5 m/v, utilizando 95% de
etanol como solvente, e a composição química foi determinada por cromatografia
líquida de alta eficiência (CLAE). A citotoxicidade do extrato foi testada pelo método
do MTT em células RAW 264.7 e HeLa. A ativação dos receptores PPAR e γ, e o
receptor TR foi testada por meio do ensaio gene-repórter da luciferase em células
HeLa. A capacidade anti-inflamatória do extrato foi avaliada após o tratamento de
células RAW 264.7 estimuladas com LPS. A análise por CLAE revelou a presença de
rutina (3,74 µg/mg) e isoquercitrina (5,92 µg/mg). O extrato apresentou citotoxicidade
apenas nas concentrações maiores que 500 µg/mg. O extrato apresentou atividade
agonista para os dois tipos de PPAR ( e γ), porém seus compostos majoritários
(rutina e isoquercitrina) não ativaram o receptor de maneira significativa. O extrato foi
capaz de reduzir a produção de óxido nítrico em 28 a 63%, de espécies reativas de
oxigênio em 25 a 53% e da citocina pró-inflamatória TNF- em 25 a 68%. O tratamento
com o antagonista específico de PPAR-, GW 6471, foi capaz de bloquear
parcialmente o efeito anti-inflamatório causado pelo extrato. Assim, possivelmente o
efeito anti-inflamatório do extrato pode ser atribuído, pelo menos em parte, à ativação
do receptor PPAR-, sendo o primeiro estudo a avaliar a ativação deste receptor pelo
extrato das folhas de M. nigra L.
Resumo Ingles
Inhibition of systemic inflammation has been a beneficial strategy in treating several
non-communicable diseases, which represent one of the major causes of mortality in
the world. The Peroxisome Proliferator-Activated Receptors (PPAR) are interesting
pharmacological targets, since they can act both through the metabolic and antiinflammatory pathways. Morus nigra L. has flavonoids in its chemical composition with
recognized antioxidant activity and often associated with anti-inflammatory activity.
Therefore, this study aimed to evaluate the hydroethanolic extract of M. nigra leaves'
ability to activate PPARs and promote anti-inflammatory effects in lipopolysaccharide
(LPS)-stimulated murine macrophage cells. The leaf extract was prepared by cold
maceration in the ratio of 1:5 m/v, using 95% ethanol as solvent, and the chemical
profile was obtained by HPLC-DAD. The cytotoxicity of the extract was tested by the
MTT method on RAW 264.7 and HeLa cells. Activation of the PPAR and γ, and the
Tr was tested using the luciferase gene-reporter assay in HeLa cells. The antiinflammatory capacity of the extract was evaluated after the treatment of LPSstimulated RAW 264.7 cells. HPLC analysis revealed the presence of rutin (3.74
µg/mg) and isoquercitrin (5.92 µg/mg). The extract showed cytotoxicity only at
concentrations greater than 500 µg/mg. The extract showed agonist activity for both
types of PPAR ( and γ), but its major compounds (rutin and isoquercitrin) did not
significantly activate the receptor. The extract was able to reduce the production of
nitric oxide from 28 to 63%, reactive oxygen species from 25 to 53% and the proinflammatory cytokine TNF-α from 25 to 68%. Treatment with the specific PPAR-α
antagonist, GW 6471, was able to partially block the anti-inflammatory effect caused
by the extract. Thus, possibly the anti-inflammatory effect of the extract can be
attributed, at least in part, to the activation of the PPAR-α receptor, being the first study
to evaluate the activation of this receptor by the extract of the leaves of M. nigra L.
Unidade academica
Faculdade de Ciências da Saúde (FS)
Programa de Pos-Graduacao
Programa de Pós-Graduação em Ciências da Saúde
Agencia financiadora
Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES).
Idioma
por
Tipo de documento
Tese
Formato
application/pdf
Direitos de acesso
Acesso Aberto
Palavras-chave
Inflamação sistêmica||Plantas medicinais||Morus nigra L.
